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姜分儀有機氯測定蛋白質的兩種方法
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?有機氯測定蛋白質的兩種主要方法包括Lowry法和Biuret法。?具體內容如下所示:
1.Lowry法
Lowry法是一種經典的蛋白質含量測定方法,基于酪氨酸和苯釕環的堿性條件下的氧化反應。具體步驟如下:
①將待測樣品與堿性染料(如費羅菲定)發生絡合反應。
②添加硫酸和焦磷酸銨將蛋白質沉淀。
③用乙醇洗滌沉淀,形成可溶的復合物。
④測量復合物在750nm波長處的光吸收度,其值與蛋白質含量成正比?。
?Lowry法?的優點是操作簡單,缺點是反應耗時長,且易受表面活性劑、螯合物和硫醇還原劑的影響。
2.Biuret法
Biuret法通過檢測在堿性條件下蛋白質與銅離子發生的絡合反應來測定蛋白質含量。具體步驟如下:
①將蛋白質樣品與堿性染料溶液(如雙縮脲試劑)混合,形成藍色絡合物。
②加入硫酸銅溶液,絡合物轉變為紫色絡合物。
③在560nm波長處測量吸光度,用于定量測定蛋白質含量?。
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?Biuret法?的優點是操作簡便,缺點是測量范圍較窄,通常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白質溶液測定?。
需要注意的是這兩種方法的選擇取決于實驗條件、樣品性質以及所需精度等因素。
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